1.項(xiàng)目背景
CK-MB（肌酸激酶MB）是肌酸激酶（CK）的三個(gè)異構(gòu)體（另兩個(gè)是CK-BB和CK-MM）之一。CK是一種肌肉代謝的主酶，而這種肌肉代謝促成由三磷酸腺苷（ATP）產(chǎn)生的肌酐磷酸化的可逆反應(yīng)。CK-MB由兩個(gè)亞單位組成（MW=40000每個(gè)）：亞單位M表示肌肉，亞單位B表示大腦。
CK-MB同工酶主要存在于心肌中，占CK總活力的20%。在前列腺、脾或骨骼肌有超過5%的CK-MB量，而CK-MB的數(shù)量還會(huì)隨肌肉類型的功能而變化。當(dāng)發(fā)生急性心肌梗死（AMI）時(shí)，CK-MB即出現(xiàn)于血循環(huán)中并說明心肌層收到了損傷。CK-MB快速升高達(dá)到高值（12小時(shí)內(nèi)），之后會(huì)下降至正常水平（36-72小時(shí)）。CK-MB值的這種上升下降的變化形式，伴隨ECG的演變和胸痛的病史，通常被認(rèn)為是AMI的診斷。CK-MB的測(cè)定也有助于溶栓療法下對(duì)心肌多次灌注液的效驗(yàn)而進(jìn)行的非侵入性評(píng)估。同時(shí)，CK-MB水平的升高也和骨骼肌損傷有關(guān)，但在AMI中并無CK-MB水平的升高和下降。
免疫抑制技術(shù)開始用于測(cè)定CK-MB活性，并與CK總活力相比（比率CK-MB/CK）。但是，由于抗M抗體不能中和的CK-BB、腺苷酸環(huán)化酶（AK）和非典型CK（大CK）的存在，有時(shí)會(huì)導(dǎo)致CK-MB結(jié)果過高。
目前，許多測(cè)定CK-MB量（ng/mL）的酶免疫技術(shù)都與CK-MB活性測(cè)量密切相關(guān)，并且不受CK-BB、非典型CK和AK的干擾。
2.性能表現(xiàn)
針對(duì)CK-MB的檢測(cè)，西寶生物推出2種單克隆抗體及1種抗原。具體性能如下
（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行抗體交叉配對(duì)驗(yàn)證）。
2.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
組合1：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）標(biāo)記吖啶酯；
線性范圍：0.3ng/mL-300ng/mL；最低檢出限：0.3ng/mL。
組合2：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記吖啶酯；
線性范圍：0.3ng/mL-300ng/mL；最低檢出限：0.3ng/mL。
2.2熒光免疫層析（鑭系元素Eu螯合物填充）平臺(tái)：
組合3：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記熒光微球+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）劃膜；
線性范圍：0.5ng/mL-100ng/mL；最低檢出限：0.5ng/mL。
2.3化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
組合4：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記堿性磷酸酶；
線性范圍：0.3ng/mL-300ng/mL；最低檢出限：0.3ng/mL。
濃度值在5000ng/mL以內(nèi)沒有發(fā)現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)(HOOK效應(yīng))。
2.4 穩(wěn)定性評(píng)估
2.4.1 堿性磷酸酶標(biāo)記抗體穩(wěn)定性
A）肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液采用AP酶標(biāo)記物稀釋液（貨號(hào)：DCD0519A）稀釋到合適濃度后，進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。如表1所示，CK-MB ALP酶工作液37℃儲(chǔ)存熱加速3天與2℃-8℃儲(chǔ)存3天發(fā)光值平均降幅超過30%以上，表明CK-MB ALP酶工作液熱穩(wěn)定性差。
表1 CK-MB ALP酶工作液熱穩(wěn)定性3天數(shù)據(jù)（不含保護(hù)劑）
序號(hào) | CK-MB校準(zhǔn)品濃度ng/mL | CK-MB ALP酶工作液37℃儲(chǔ)存熱加速3天與2℃-8℃儲(chǔ)存3天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | -1.58% |
S1 | 5 | -30.68% |
S2 | 25 | -28.41% |
S3 | 50 | -36.64% |
S4 | 150 | -31.84% |
S5 | 350 | -35.86% |
平均變化（不含S0） | -32.68% | |
B）在AP酶標(biāo)記物稀釋液（貨號(hào)：DCD0519A）中添加5%左右的蛋白保護(hù)劑GH（貨號(hào)：DCL0009A）配成新的AP酶稀釋液，繼續(xù)進(jìn)行肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記堿性磷酸酶的37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。如表2所示，CK-MB ALP酶工作液37℃儲(chǔ)存熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均降幅在10%左右，表明CK-MB ALP酶工作液熱穩(wěn)定性良好。本實(shí)驗(yàn)表明蛋白保護(hù)劑GH（貨號(hào)：DCL0009A）對(duì)CK-MB ALP酶工作液的穩(wěn)定性有很大幫助。
表2 CK-MB ALP酶工作液熱穩(wěn)定性7天數(shù)據(jù)（含保護(hù)劑）
序號(hào) | CK-MB校準(zhǔn)品濃度ng/mL | CK-MB ALP酶工作液（含蛋白保護(hù)劑GH）37℃儲(chǔ)存熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | 2.7% |
S1 | 5 | -8.5% |
S2 | 25 | -7.0% |
S3 | 50 | -10.4% |
S4 | 150 | -13.9% |
S5 | 350 | -4.8% |
平均變化（不含S0） | -8.9% | |
2.4.2 CK-MB抗原穩(wěn)定性
A）采用CK-MB抗原稀釋液（貨號(hào)：DCD0520A）將CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）稀釋成5個(gè)梯度（液體型），進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。如表3所示，CK-MB抗原稀釋梯度（液體型）37℃熱加速3天與2℃-8℃儲(chǔ)存3天發(fā)光值平均降幅超過90%以上，表明CK-MB抗原稀釋梯度（液體型）熱穩(wěn)定性差。
表3 CK-MB抗原稀釋梯度（液體型）熱穩(wěn)定性3天數(shù)據(jù)
序號(hào) | CK-MB校準(zhǔn)品濃度ng/mL | CK-MB 抗原稀釋梯度（液體型）37℃熱加速3天與2℃-8℃儲(chǔ)存3天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | 0.3% |
S1 | 5 | -89.3% |
S2 | 25 | -96.9% |
S3 | 50 | -97.9% |
S4 | 150 | -98.8% |
S5 | 350 | -99.1% |
平均變化（不含S0） | -96.4% | |
B）采用Seebio CK-MB抗原稀釋液（貨號(hào)：DCD0520A）將CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）稀釋成5個(gè)梯度做凍干（凍干型），進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。如表4所示，CK-MB抗原稀釋梯度（凍干型）37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均降幅在5%左右，表明CK-MB抗原稀釋梯度（凍干型）熱穩(wěn)定性良好。
表4 CK-MB抗原稀釋梯度（凍干型）熱穩(wěn)定性7天數(shù)據(jù)
序號(hào) | CK-MB校準(zhǔn)品濃度ng/mL | CK-MB 抗原稀釋梯度 （凍干型）37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | 1.1% |
S1 | 5 | -6.5% |
S2 | 25 | -2.3% |
S3 | 50 | -3.9% |
S4 | 150 | -2.8% |
S5 | 350 | -2.6% |
平均變化（不含S0） | -3.6% | |
3.臨床相關(guān)性
3.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)CK-MB抗體配對(duì)組合1與羅氏CK-MB試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)CK-MB抗體配對(duì)組合2與羅氏CK-MB試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
3.2熒光免疫層析平臺(tái)：
西寶生物熒光平臺(tái)CK-MB抗體配對(duì)組合3與羅氏CK-MB試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
3.3化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)CK-MB抗體配對(duì)組合4與羅氏CK-MB試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
4.測(cè)試方案
4.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
4.1.1抗體配對(duì)組合1
待測(cè)抗原:CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；
試劑1：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：20ul樣品+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
4.1.2抗體配對(duì)組合2
待測(cè)抗原:CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；
試劑1：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：20ul樣品+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2熒光免疫層析平臺(tái)抗體配對(duì)組合3：
待測(cè)抗原:CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量10ul；
反應(yīng)條件：樣本+熒光液混勻，上樣，反應(yīng)時(shí)間（10min-15min）；
測(cè)試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
4.3化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)抗體配對(duì)組合4
待測(cè)抗原:CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）
樣本/校準(zhǔn)品:樣品加樣量20ul；
試劑1：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣品+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 推薦配對(duì)及其他信息 |
AP酶標(biāo)記物稀釋液 | DCD0519A | / |
蛋白保護(hù)劑GH | DCL0009A | 推薦使用濃度5%左右 |
CK-MB抗原稀釋液 | DCD0520A | / |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 | EKY0095J | 肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合1） 肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合2） 肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記熒光微球+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）劃膜（熒光配對(duì)組合3） 肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光配對(duì)組合4） |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 | EKY0095K | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗原 | EDD0408B | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095J）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1312A | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095K）-吖啶酯濃縮液 | DKY1312B | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095K）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1312C | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095J）-吖啶酯濃縮液 | DKY1312D | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1312E | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095J）-堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1312F | |
羧基磁性微球，1.5um | DEG0800C | |
時(shí)間分辨熒光微球，羧基（200nm） | AEG0786B |
1.項(xiàng)目背景
CK-MB（肌酸激酶MB）是肌酸激酶（CK）的三個(gè)異構(gòu)體（另兩個(gè)是CK-BB和CK-MM）之一。CK是一種肌肉代謝的主酶，而這種肌肉代謝促成由三磷酸腺苷（ATP）產(chǎn)生的肌酐磷酸化的可逆反應(yīng)。CK-MB由兩個(gè)亞單位組成（MW=40000每個(gè)）：亞單位M表示肌肉，亞單位B表示大腦。
CK-MB同工酶主要存在于心肌中，占CK總活力的20%。在前列腺、脾或骨骼肌有超過5%的CK-MB量，而CK-MB的數(shù)量還會(huì)隨肌肉類型的功能而變化。當(dāng)發(fā)生急性心肌梗死（AMI）時(shí)，CK-MB即出現(xiàn)于血循環(huán)中并說明心肌層收到了損傷。CK-MB快速升高達(dá)到高值（12小時(shí)內(nèi)），之后會(huì)下降至正常水平（36-72小時(shí)）。CK-MB值的這種上升下降的變化形式，伴隨ECG的演變和胸痛的病史，通常被認(rèn)為是AMI的診斷。CK-MB的測(cè)定也有助于溶栓療法下對(duì)心肌多次灌注液的效驗(yàn)而進(jìn)行的非侵入性評(píng)估。同時(shí)，CK-MB水平的升高也和骨骼肌損傷有關(guān)，但在AMI中并無CK-MB水平的升高和下降。
免疫抑制技術(shù)開始用于測(cè)定CK-MB活性，并與CK總活力相比（比率CK-MB/CK）。但是，由于抗M抗體不能中和的CK-BB、腺苷酸環(huán)化酶（AK）和非典型CK（大CK）的存在，有時(shí)會(huì)導(dǎo)致CK-MB結(jié)果過高。
目前，許多測(cè)定CK-MB量（ng/mL）的酶免疫技術(shù)都與CK-MB活性測(cè)量密切相關(guān)，并且不受CK-BB、非典型CK和AK的干擾。
2.性能表現(xiàn)
針對(duì)CK-MB的檢測(cè)，西寶生物推出2種單克隆抗體及1種抗原。具體性能如下
（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行抗體交叉配對(duì)驗(yàn)證）。
2.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
組合1：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）標(biāo)記吖啶酯；
線性范圍：0.3ng/mL-300ng/mL；最低檢出限：0.3ng/mL。
組合2：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記吖啶酯；
線性范圍：0.3ng/mL-300ng/mL；最低檢出限：0.3ng/mL。
2.2熒光免疫層析（鑭系元素Eu螯合物填充）平臺(tái)：
組合3：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記熒光微球+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）劃膜；
線性范圍：0.5ng/mL-100ng/mL；最低檢出限：0.5ng/mL。
2.3化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
組合4：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記堿性磷酸酶；
線性范圍：0.3ng/mL-300ng/mL；最低檢出限：0.3ng/mL。
濃度值在5000ng/mL以內(nèi)沒有發(fā)現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)(HOOK效應(yīng))。
2.4 穩(wěn)定性評(píng)估
2.4.1 堿性磷酸酶標(biāo)記抗體穩(wěn)定性
A）肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液采用AP酶標(biāo)記物稀釋液（貨號(hào)：DCD0519A）稀釋到合適濃度后，進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。如表1所示，CK-MB ALP酶工作液37℃儲(chǔ)存熱加速3天與2℃-8℃儲(chǔ)存3天發(fā)光值平均降幅超過30%以上，表明CK-MB ALP酶工作液熱穩(wěn)定性差。
表1 CK-MB ALP酶工作液熱穩(wěn)定性3天數(shù)據(jù)（不含保護(hù)劑）
序號(hào) | CK-MB校準(zhǔn)品濃度ng/mL | CK-MB ALP酶工作液37℃儲(chǔ)存熱加速3天與2℃-8℃儲(chǔ)存3天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | -1.58% |
S1 | 5 | -30.68% |
S2 | 25 | -28.41% |
S3 | 50 | -36.64% |
S4 | 150 | -31.84% |
S5 | 350 | -35.86% |
平均變化（不含S0） | -32.68% | |
B）在AP酶標(biāo)記物稀釋液（貨號(hào)：DCD0519A）中添加5%左右的蛋白保護(hù)劑GH（貨號(hào)：DCL0009A）配成新的AP酶稀釋液，繼續(xù)進(jìn)行肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記堿性磷酸酶的37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。如表2所示，CK-MB ALP酶工作液37℃儲(chǔ)存熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均降幅在10%左右，表明CK-MB ALP酶工作液熱穩(wěn)定性良好。本實(shí)驗(yàn)表明蛋白保護(hù)劑GH（貨號(hào)：DCL0009A）對(duì)CK-MB ALP酶工作液的穩(wěn)定性有很大幫助。
表2 CK-MB ALP酶工作液熱穩(wěn)定性7天數(shù)據(jù)（含保護(hù)劑）
序號(hào) | CK-MB校準(zhǔn)品濃度ng/mL | CK-MB ALP酶工作液（含蛋白保護(hù)劑GH）37℃儲(chǔ)存熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | 2.7% |
S1 | 5 | -8.5% |
S2 | 25 | -7.0% |
S3 | 50 | -10.4% |
S4 | 150 | -13.9% |
S5 | 350 | -4.8% |
平均變化（不含S0） | -8.9% | |
2.4.2 CK-MB抗原穩(wěn)定性
A）采用CK-MB抗原稀釋液（貨號(hào)：DCD0520A）將CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）稀釋成5個(gè)梯度（液體型），進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。如表3所示，CK-MB抗原稀釋梯度（液體型）37℃熱加速3天與2℃-8℃儲(chǔ)存3天發(fā)光值平均降幅超過90%以上，表明CK-MB抗原稀釋梯度（液體型）熱穩(wěn)定性差。
表3 CK-MB抗原稀釋梯度（液體型）熱穩(wěn)定性3天數(shù)據(jù)
序號(hào) | CK-MB校準(zhǔn)品濃度ng/mL | CK-MB 抗原稀釋梯度（液體型）37℃熱加速3天與2℃-8℃儲(chǔ)存3天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | 0.3% |
S1 | 5 | -89.3% |
S2 | 25 | -96.9% |
S3 | 50 | -97.9% |
S4 | 150 | -98.8% |
S5 | 350 | -99.1% |
平均變化（不含S0） | -96.4% | |
B）采用Seebio CK-MB抗原稀釋液（貨號(hào)：DCD0520A）將CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）稀釋成5個(gè)梯度做凍干（凍干型），進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。如表4所示，CK-MB抗原稀釋梯度（凍干型）37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值平均降幅在5%左右，表明CK-MB抗原稀釋梯度（凍干型）熱穩(wěn)定性良好。
表4 CK-MB抗原稀釋梯度（凍干型）熱穩(wěn)定性7天數(shù)據(jù)
序號(hào) | CK-MB校準(zhǔn)品濃度ng/mL | CK-MB 抗原稀釋梯度 （凍干型）37℃熱加速7天與2℃-8℃儲(chǔ)存7天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | 1.1% |
S1 | 5 | -6.5% |
S2 | 25 | -2.3% |
S3 | 50 | -3.9% |
S4 | 150 | -2.8% |
S5 | 350 | -2.6% |
平均變化（不含S0） | -3.6% | |
3.臨床相關(guān)性
3.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)CK-MB抗體配對(duì)組合1與羅氏CK-MB試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)CK-MB抗體配對(duì)組合2與羅氏CK-MB試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
3.2熒光免疫層析平臺(tái)：
西寶生物熒光平臺(tái)CK-MB抗體配對(duì)組合3與羅氏CK-MB試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
3.3化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)CK-MB抗體配對(duì)組合4與羅氏CK-MB試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
4.測(cè)試方案
4.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
4.1.1抗體配對(duì)組合1
待測(cè)抗原:CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；
試劑1：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：20ul樣品+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
4.1.2抗體配對(duì)組合2
待測(cè)抗原:CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；
試劑1：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：20ul樣品+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2熒光免疫層析平臺(tái)抗體配對(duì)組合3：
待測(cè)抗原:CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量10ul；
反應(yīng)條件：樣本+熒光液混勻，上樣，反應(yīng)時(shí)間（10min-15min）；
測(cè)試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
4.3化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)抗體配對(duì)組合4
待測(cè)抗原:CK-MB抗原（貨號(hào)：EDD0408B）
樣本/校準(zhǔn)品:樣品加樣量20ul；
試劑1：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣品+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 推薦配對(duì)及其他信息 |
AP酶標(biāo)記物稀釋液 | DCD0519A | / |
蛋白保護(hù)劑GH | DCL0009A | 推薦使用濃度5%左右 |
CK-MB抗原稀釋液 | DCD0520A | / |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 | EKY0095J | 肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合1） 肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合2） 肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記熒光微球+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）劃膜（熒光配對(duì)組合3） 肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095K）包被羧基磁珠+肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體（貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光配對(duì)組合4） |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 | EKY0095K | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗原 | EDD0408B | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095J）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1312A | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095K）-吖啶酯濃縮液 | DKY1312B | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095K）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1312C | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095J）-吖啶酯濃縮液 | DKY1312D | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095J）標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1312E | |
肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗體 （貨號(hào)：EKY0095J）-堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1312F | |
羧基磁性微球，1.5um | DEG0800C | |
時(shí)間分辨熒光微球，羧基（200nm） | AEG0786B |
