全能核酸酶，可重復(fù)性去除DNA

生物制藥與疫苗 | 2021-09-29

在生物制品的制備/生產(chǎn)過(guò)程中，去除DNA殘留是極為重要的。常用的去除DNA的方法如沉淀法在DNA殘留要求較高的時(shí)候難以達(dá)到，因?yàn)闀?huì)發(fā)生聚集和包裹現(xiàn)象，影響去除效率。而酶解法在使用時(shí)需摸索較佳條件，操作繁瑣，重復(fù)性差。直至全能核酸酶的出現(xiàn)，才能可重復(fù)性地去除DNA，保證了生物制品的高品質(zhì)和高產(chǎn)量。西寶生物隆重推出DENARASE?全能核酸酶，采用非動(dòng)物性原料，不添加抗生素，符合GMP生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)，滿(mǎn)足法規(guī)要求，在病毒載體疫苗等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。訂購(gòu)熱線 400-021-8158。

產(chǎn)品描述

DENARASE?全能核酸酶是一款來(lái)自粘質(zhì)沙雷菌的基因工程內(nèi)切酶，是生物制品生產(chǎn)工藝中常用全能核酸酶的典型代表。DENARASE?全能核酸酶能夠降解所有形式的DNA和RNA(包括單鏈、雙鏈、線性、超螺旋和環(huán)狀DNA、RNA及基因組DNA)，形成較小的寡核苷酸（主要由2-5個(gè)堿基對(duì)組成）對(duì)核酸序列沒(méi)有特異性，且沒(méi)有蛋白酶活性。

分子量：27 kDa (具有兩個(gè)相同亞基的單體)
適合pH：pH 8.0~9.0
適合溫度：37℃
等電點(diǎn)：pH 6.2
輔因子：Mg²⁺

產(chǎn)品以液體形式提供，制劑組成：20mM Tris鹽酸鹽緩沖液pH8.2，20mM氯化鈉，2mM氯化鎂，50%甘油(v/v)。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

采用革蘭氏陽(yáng)性的芽孢桿菌生產(chǎn)，降低了內(nèi)毒素污染風(fēng)險(xiǎn)；
采用非動(dòng)物性原料，不添加抗生素，符合GMP生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)；
降解所有形式的DNA和RNA；
無(wú)蛋白酶、內(nèi)毒素污染；
廣泛的試劑兼容性；
超高的核酸消化活力；
每批次產(chǎn)品嚴(yán)格質(zhì)保與功能驗(yàn)證。

質(zhì)量指標(biāo)

項(xiàng)目	標(biāo)準(zhǔn)值
外觀	無(wú)色透明溶液
活性*	≥250u/ul
純度	≥99%
比活	＞6*10^5 U/mg
蛋白酶活性	未檢出
內(nèi)毒素水平	＜0.25EU/Ku
菌落總數(shù)	致病菌<5cfu/200ul; 霉菌&酵母<5cfu/200ul

*活性單位定義：在37℃，pH 8.0反應(yīng)條件下，在30 min內(nèi)使△A260吸收值變化1.0（相當(dāng)于消化37μg鮭魚(yú)精DNA成為寡核苷酸）所用的酶量定義為一個(gè)活性單位（U）。

合規(guī)性/證書(shū)

制造過(guò)程符合歐盟cGMP要求。

本產(chǎn)品的進(jìn)一步生產(chǎn)不使用抗生素或使用來(lái)自動(dòng)物的原材料（無(wú)動(dòng)物產(chǎn)品和BSE/TSE證書(shū)）。

儲(chǔ)存條件

在-20°C的儲(chǔ)存溫度下，從出廠之日起24個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。注意：不建議將產(chǎn)品儲(chǔ)存在-70°C或以下，因?yàn)槔鋬霎a(chǎn)品會(huì)導(dǎo)致活性損失。

產(chǎn)品應(yīng)用

用于疫苗的病毒或病毒樣顆粒純化：核酸酶通過(guò)去除病毒類(lèi)產(chǎn)品外源性核酸，降低核酸殘留毒性風(fēng)險(xiǎn)，提高產(chǎn)品安全性；
改善重組蛋白工藝：進(jìn)行重組蛋白純化或者自然蛋白提取研究中，第一步就需要用裂解液對(duì)其進(jìn)行裂解釋放蛋白，此時(shí)往往伴隨著大量的基因組DNA被釋放出來(lái)，很多并不是獨(dú)立存在的，往往與核蛋白以復(fù)合物的形式存在，導(dǎo)致提取物很粘稠，呈鼻涕狀。蛋白提取過(guò)程中若不能很好處理這些粘稠基因組，會(huì)造成蛋白提取效率的降低和丟失。
若在加裂解液的同時(shí)加入一定量的DENARASE?全能核酸酶，可以很好的清除粗提物中的核酸，降低粘度，提高后續(xù)操作的效率。工程細(xì)胞裂解后加入核酸酶可降低料液的黏度，縮短處理時(shí)間，提高蛋白產(chǎn)量；
顆粒(病毒、包涵體等)預(yù)處理：核酸很容易粘附在病毒樣顆粒（VLP）、病毒粒子、包涵體等細(xì)胞生成顆粒的表面，使顆粒大小或電荷發(fā)生改變，造成這些顆粒的聚集。全能核酸酶可降解核酸，避免核酸對(duì)細(xì)胞產(chǎn)物的影響，利于提高細(xì)胞產(chǎn)物純化效率；
電泳和色譜樣品的制備：用于ELISA、柱層析、二維電泳和印跡分析的樣品制備，經(jīng)核酸酶處理后可提高分辨率和回收率。

作用條件

條件參數(shù)	適合條件	可作用條件
	-2 mM	1-10 mM
pH	8.0-9.2	6.0-10.0
Temp	37℃	0-42℃
DTT	0-100 mM	>100 mM
β-Mercaptoethanol	0-100 mM	>100 mM
Monovalent cation（Na⁺，K⁺）	0-20 mM	0-150 mM
PO₄^3-	0-10 mM	0-100 mM

訂貨信息

名稱(chēng)	貨號(hào)	規(guī)格	描述
DENARASE 全能核酸酶	TCE0358A-100K	100KU	>250 U/ul，制造和罐裝均符合cGMP
	TCE0358A-500K	500KU
	TCE0358A-1000K	1000KU
	TCE0358A-5000K	5000KU
	TCE0358A-1M	1MU	>250 U/ul，制造符合cGMP，罐裝符合ISO9001
	TCE0359A-5M	5MU	>250 U/ul，制造符合cGMP，罐裝符合ISO9001

DENARASE全能核酸酶與EonucleaseGTP ELISA核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè)試劑盒（Cygnus，貨號(hào)F960）搭配使用，更佳。

核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒

這款核酸酶檢測(cè)試劑盒具有極高的靈敏度和特異性，主要用于定量檢測(cè)重組病毒載體和疫苗制備過(guò)程中可能存在的內(nèi)切酶雜質(zhì)。哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用于表達(dá)重組病毒載體和疫苗，這種方法成本效益高，適用于大規(guī)模生產(chǎn)基因治療和疫苗生物制品。在這些產(chǎn)品的生產(chǎn)和純化過(guò)程中，內(nèi)切酶污染是一個(gè)需要重視的問(wèn)題，因?yàn)閮?nèi)切酶常被用來(lái)清除宿主細(xì)胞的內(nèi)源性DNA和RNA，以及未整合的病毒載體質(zhì)粒DNA。因此，將內(nèi)切酶污染降到最低至關(guān)重要。

該試劑盒利用Serratia marcescens基因工程內(nèi)切酶產(chǎn)生的抗體和親和純化技術(shù)。其檢測(cè)限大約為60pg/ml，提供了一種高靈敏度和特異性的檢測(cè)方法，有助于純化過(guò)程的開(kāi)發(fā)、過(guò)程控制、常規(guī)質(zhì)量控制以及產(chǎn)品放行測(cè)試。試劑盒采用簡(jiǎn)便的同步操作協(xié)議，樣品中的內(nèi)切酶與HRP標(biāo)記的抗內(nèi)切酶檢測(cè)抗體在微孔板條上同時(shí)反應(yīng)，而微孔板條上涂有經(jīng)過(guò)親和純化的捕獲抗內(nèi)切酶抗體。

內(nèi)切核酸酶試劑盒包含所有必需成分，用于檢測(cè)96個(gè)樣本中的內(nèi)切核酸酶雜質(zhì)，包括一套校準(zhǔn)的內(nèi)切核酸酶標(biāo)準(zhǔn)品。它適用于檢測(cè)基因工程內(nèi)切核酸酶，例如Benzonase核酸酶和DENARASE。

產(chǎn)品信息

檢測(cè)方法	ELISA
檢測(cè)工具	96孔板
檢測(cè)時(shí)間	約1h50min
檢測(cè)限	0.06ng/ml
定量限	0.31ng/ml

訂購(gòu)信息

產(chǎn)品貨號(hào)	產(chǎn)品名稱(chēng)	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品用途
F960	EndonucleaseGTP? ELISA Kit	1 kit	核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒
I600	Recommended Diluent	25ml/100ml	稀釋試劑

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